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技術原理

熒光定量PCR儀檢測新型冠狀病毒步驟

作者:熒光定量PCR儀???發布時間:2020-05-08

    熒光定量PCR儀是目前開展對新型冠狀病毒核酸檢測的必備儀器,該儀器與檢測試劑盒配套可以快速高效檢測病人樣本是否被新型冠狀病毒感染,是目前病毒確診的使用最廣泛的手段

    我國主要的幾種檢測試劑盒都是基于RT-PCR原理。因為需要檢測的病毒樣本濃度有高有低,高的容易檢測,低濃度就會漏掉。所以PCR的方法就把病毒基因擴增很多倍,達到可以檢測出來的濃度?;静僮魅缦拢?/p>

    1.收集咽拭子等病毒樣本,通過試劑打碎保護病毒的蛋白質殼子,萃取病毒RNA。一方面是萃取,另一反面,打碎之后就沒有了感染性,相對安全一些。

    2.由于這次新冠肺炎是單鏈RNA病毒,所以要先轉換成cDNA。這個可以類比像是視頻文件,mp4,rmvb,avi這些都是常見格式,同一個視頻不同格式,意思都一樣,可以互相轉換。

    3.常規PCR反應,加熱到94℃把DNA拉鏈拉開,之后再55℃-60℃讓引物,就是拉鏈扣分別套在兩條拉鏈上,再升溫到72℃讓拉鏈自己復制,用左拉鏈做模板造一個右拉鏈,用右拉鏈做模板造一個左拉鏈。這樣折騰一次為一個循環,RNA數量翻一倍。之后再折騰25-30次。這樣就算很少量的病毒這個時候也顯現出來了。

    熒光定量PCR檢測數據

    從接到標本到完成檢測共需要五個步驟。一是對送檢標本進行登記核對;二是對標本進行水浴滅活;三是完成病毒核酸的提??;四是進行熒光PCR擴增;五是對測試結果分析判斷。使用熒光定量pcr儀的時候每個步驟都需要精力高度集中,保證操作萬無一失。

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