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常見問題

PCR Array技術原理是什么,優勢有哪些

作者:熒光定量PCR儀???發布時間:2020-11-03

    PCR Array 技術也被稱作基因功能分類芯片或PCR陣列,它結合了Real Time PCR技術的高靈敏性和高特異性和微陣列技術可以同時檢測多個基因的優勢,是分析信號通路或某生物學功能相關基因表達狀態的首選工具。

    芯片上的基因包括了與研究對象有確定關系的基因,或至少是與研究對象的關系有待考證的基因,如果研究對象是某一生物學通路的基因,則使用針對該類基因的功能分類基因芯片比使用高密度表達譜芯片更加有效便利。在一張96孔或384孔板上可同時對某個信號通路或某生物學功能相關的370個重要基因的表達量變化進行檢測(其余為對照樣本孔),為實驗研究者節省了大量預實驗、引物驗證、文獻選擇基因等繁瑣的過程,可以直接明了的了解不同課題研究中某信號通路或疾病中關鍵基因的表達譜。

    PCR Array 技術原理:

    PCR Arrays是分析一組特定基因表達的可靠工具,引物經過優化。每個96孔板、384孔板PCR Array都包含SYBR® Green優化的引物分析,可對相關的通路或疾病相關的基因進行細致的研究,并含有相應的RNA、DNA質量控制。PCR Arrays也可針對您特定的研究興趣對一些基因作定制化分析。高品質引物設計和qPCR Master mix使PCRArray可在統一的循環條件下同時擴增96或384個不同的基因特異性產物。

    PCR Arrays進行的基因表達分析具有real-time PCR的靈敏度和微陣列的多基因檢測能力。這種整合使PCR Array具有高特異性和擴增效率,可獲得準確的SYBR® Green real-time PCR結果。PCR芯片在任何研究實驗室都易于使用。PCR Arrays具有足夠高的敏感度,可使用從常規樣本(0.1–5 µg RNA)、FFPE樣本和小樣本(1–100 ng RNA)制備的RNA。

    PCR Array 性能優勢:

    靈敏度:

    每個芯片使用至少1 ng或至多5 µg總RNA可獲得高于80%的陽性信號率,即使細胞中細胞因子的表達量很低,25 ng總RNA的陽性率也>80%。
    靈敏度

    重復性:

    圖為對比不同研究人員在間隔3個月的時間下使用不同批次的Human Drug Metabolism PCR Arrays芯片所得到的重復結果,計算兩次CT值結果的相關系數,分別為0.995 +0.001和 0.998 +0.000。
    重復性

    特異性:

    PCR Array體系使用高品質RNA,可在預期位置形成單條帶,無引物二聚體或其他二級產物,由此可獲得高度準確的real-time PCR結果。

    統一的PCR擴增效率:

    對多種樣本的多個基因進行準確的基因表達比較,需要PCR芯片技術具有統一的PCR擴增效率。將專有的引物設計法則與嚴格的引物分析檢測相結合,確保PCR芯片的每次引物分析都具有高性能。

    PCR芯片能夠獲得高度準確的結果:使用PCR Arrays對多基因進行分析,在99%的置信區間內,PCR的擴增效率在90%-110%之間,持續的高擴增效率確保PCR芯片能夠使用ΔΔCT法準確的分析多種基因。

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